【實驗技術介紹-Digital PCR】

Digital Polymerase Chain Reaction (數位聚合酶連鎖反應)是一種基於數據化、數量化的PCR擴增系統。

有別於傳統的PCR及real-time PCR，Digital PCR具有更高的準確度和靈敏度，因此近年來需求和應用領域迅速擴增。

Digital PCR將多分子的單一PCR反應轉變成單分子PCR反應集合。它透過微流體的方式，將單一DNA模板分配到單一反應空間中，

通過PCR的擴增，當反應空間中存在目標分子時，會產生擴增產物並釋放出螢光訊號，當反應空間中不存在目標分子時，不會產生擴增產物。

定量方法為計算實驗中的單一擴增產物數目比例，根據所有反應空間中，有釋放出螢光與沒有螢光，兩者數量的比例，

計算出原始反應空間中所含有的目標DNA的絕對copy數或絕對量。不會受限於PCR增幅效應的影響，不需標準曲線來推測分子數目。

Digital PCR因為具有更高的準確度和靈敏度等優點，因此適合應用在基因序列變異的偵測(copy number variants或點突變)和轉殖基因等技術的應用。

另外，它還可以應用於人類gDNA、細菌DNA和NGS Library的定量等..。