現今基因工程的方法(Mutagenesis)會普遍使用修改基因的DNA序列來造成胺基酸改變，進而影響蛋白質的表達量、功能、結構及修飾等。1978年Michael Smith藉由設計後的引子進行PCR，在DNA特定位置產生突變，來控制突變位置。相較於過去隨機突變，此種方法稱為定點突變 (Site-directed mutagenesis)。

定點突變主要可以分成兩種方式進行。

1. 透過配對錯誤的引子，與欲改變之DNA模板進行PCR，從而得到突變DNA片段，之後將片段透過PCR放大得到完整DNA (圖一)
2. 利用DNA聚合酶，透過一對錯誤配對之引子放大出突變的DNA片段，而正向及反向引子會直接複製完整的質體，不需經由第二次PCR放大。之後將線性DNA透過磷酸化及ligase作用形成環狀DNA。由於原本的質體是細菌複製合成，會帶有甲基修飾，可藉由DpnI辨識甲基位置的特性去除原始的模板DNA，最後再將其轉殖至勝任細胞即完成定點突變 (圖二)。 

隨著科技進步，市面上已經研發出許多商品，例如：由NEB發售Q5® Site-Directed Mutagenesis Kit、Agilent的QuikChange系列等，可供科學家快速且精準的方式來完成突變。

定點突變的應用領域很廣，比如研究蛋白質相互作用位點、提高蛋白的抗原性或是穩定性、活性以及基因治療等等方面。因此在各個領域，不管是基因體或是蛋白質體研究等等，都是相當常見及有用的技術，也為生命科學帶來了飛速的發展。

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