【NGS Introduction Series-Single Cell Data Analysis(II)】

Date: 2023-3-17

經過scRNA-Seq的分析並獲得各細胞表現量的資訊後,後續會進行篩選細胞資訊,通常以繪製Knee plot進行評估;評估完之後會進行細胞的分群,以便找出不同細胞型態的資訊,一般可以透過t-SNE、UMAP等分析方法來區分細胞型態。

Knee plot是用來判斷資料的截取點〈cutoff point〉,在single cell分析中主要是用來評估實際抓到的細胞數目。圖表中的X軸代表依照UMI的數量多寡進行排序並計算符合條件的細胞數量。而Y軸代表為累計UMI數量的比例。紅線左側即預期所篩選的細胞。

t-SNE〈t-distributed Stochastic Neighbor Embedding〉/UMAP〈Uniform Manifold Approximation and Projection〉是透過降維至二維或是三維的方式,來視覺化擁有多個資料 (Ex: genes) 樣本分布情況。此分析的演算法具有隨機性,每次分可以產生不同的結果。而須注意的事情為圖上之間的距離沒有意義,並不是越靠近就越相似。

 

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