【NGS Introduction Series-Single Cell Data Analysis(I)】

Date: 2023-1-13

近年來有關單細胞轉錄體定序(scRNA-Seq)的研究越來越盛行,此技術能夠針對不同細胞群分析其基因的表現量差異。分析scRNA-Seq資料的方法,主要以二代定序的雙端數據資料為主。

所獲得的定序資料結構如下圖所示。由於是雙端定序數據,通常其中一端序列資訊主要目的為辨識區分每單一細胞內的RNA分子,分成兩個部分:每顆細胞的辨識編碼(Cell Barcode)與RNA單一分子編碼(UMI, Unique Molecular Index);而另一端序列主要為RNA的基因序列,用來判斷是哪個基因。最後結合這兩端的資訊來獲得不同顆細胞之間內的基因表現量。

分析時會先去除定序品質較差的部分,以確保後續分析的準確性。之後,分成兩部分,一為包含細胞資料的那端序列,會被切割成Barcode及UMI兩個區塊進行分析。Cell Barcode的作用為區分每一顆細胞;而UMI的作用主要可以用來校正因PCR步驟導致的重複序列。而另一端RNA序列則會針對參考序列(Reference)進行比對,對序列進行基因註解。透過現有的軟體,如Cell Ranger或是dropSeqPipe就能完成上述的分析步驟。之後可以針對獲得的基因表現量數據結果,推薦使用Seurat軟體進行分析,針對基因表現量或特定基因的marker進行細胞分群,進而找出不同細胞群之間的差異基因等。

 

#詳盡的售後服務諮詢

#專屬的數據管理系統

#迅速的發送結果報告

#專業的生物資訊分析

#源資生技

#TriIBiotech

#scRNASeq

#SingleCellSequencing

Next Generation Sequencing (NGS) Sequencing Service


1. Nanopore and Illumina offer a complete range of sequencing platforms for long and short sequences.
2. An excellent choice for high efficiency and quality.
3. Professional sample quality control processes and library preparation.
4. Professional bioinformatics analysis and service consultation.