內質網 (ER) 是細胞內最大的胞器，具有獨特且動態的管狀或片狀結構。內質網在蛋白質合成和碳水化合物代謝中扮演著重要的角色，並且是分泌蛋白質(secreted pathway proteins) (包括高爾基體(Golgi)、胞吐作用(Exocytosis)、細胞膜和細胞外蛋白)的運輸起點。

        應用於內質網 (ER) 的觀察和研究，最傳統的內質網染料是基於格列本脲 (Glibenclamide) 的螢光團結合物。格列本脲是一種公認有效且具特異性的ATP敏感性鉀離子通道磺酰脲受體 (sulphonylurea receptors) 抑制劑。它能選擇性地定位於內質網上，因此基於格列本脲此特性的內質網染料可以應用於內質網結構呈像。然而，這類染料具有影響鉀離子通道的負面藥理，且容易被洗脫而影響到內質網的觀察。

        直到由 Diagnocine 開發的 ERseeing 問世，它在藥理上對內質網功能幾乎沒有影響，並且即使在洗脫或更換培養基後也能夠將內質網呈像。ERseeing具有兩個單元：一個囉多爾型 (rhodol type) 綠色螢光染料和一個硫酯型 (thioester type) 蛋白質標記基團。由於這種囉多爾型染料對內質網膜具有高親和力，在將試劑加入細胞後，它會選擇性地快速積聚到內質網中。一旦積聚在內質網中，ERseeing 的標記基團會與內質網蛋白中的胺基酸隨機反應，形成穩定的共價鍵，進而長時間滯留於內質網，便於觀察與研究。

        進一步試驗探討 ERseeing 效能，如下圖所示，HeLa 細胞以 ERseeing 或格列本脲類染料處理15分鐘後，不經洗滌直接觀察 (左圖)。兩種試劑均顯示內質網染色。之後，用 PBS 洗滌細胞，加入含10% FBS的新鮮培養基。再次觀察，格列本脲類染料在細胞中顯示出非常微弱的訊號，而 ERseeing 則保持了良好的內質網螢光訊號。由此可以驗證 ERseeing 適用於更換培養基後的長期影像追蹤。

       最後，小編幫大家整理 ERseeing, Endoplasmic Reticulum Green Dye 的優點:

• 不可逆染色： 允許長期觀察

• 低藥理作用： 對細胞功能的影響極小

• 耐洗脫：於更換或洗脫培養基後，仍能保持強烈信號

       這麼好用的試劑，趕快揪團來下單~

#源資生技

#TriIBiotech

#Funakoshi

# ERseeing

#源資代理