Gene cloning技術目的是將您所感興趣的基因片段接入質體(Plasmid)中，

方便日後保存、複製大量該基因片段並可搭配表現質體，表現該基因片段，以及其它實驗應用 

基因接入載體質體(vector)有下列數種方法；

• Restriction enzyme cloning

利用vector上的限制酶切位，將目標基因片段利用相同限制酶切位切下，

或以PCR方式使目標基因片段帶有相同限制酶切位，經限制酶作用後，再以T4 DNA ligase與vector接合。

Restriction enzyme cloning的優點：可透過限制酶切位自行選擇要接入的位置，vector可用限制酶自行製備。

• TA-Cloning

利用特定聚合酶會在目標片段的3’端加上一個adenine 鹼基 (A)的特性，

再與先行製備的質體dT vector (5’端帶有thymine 鹼基 (T)) ，透過T4 DNA ligase進行接合反應(ligation)

TA-Cloning的優點是：不需考慮是否有合適的限制酶切位，也不需額外設計引子。

• Gateway cloning

原理建立於嗜菌體(phage)感染細菌時其本身帶有的特定序列(attP)，會與細菌中對應的序列(attB)進行重組

將嗜菌體所帶的基因嵌入細菌genome。Gateway cloning即是利用此一原理，只要在標的基因兩端加上(attP)序列

便可快速且正確將其置入已設計好帶有(attB)的載體。

本公司提供TA-Cloning 與Restriction enzyme cloning 服務，

除了可客製化建構您的目標construct，還可應用於本公司的一般定序服務。

例如以TA-Cloning方式解決您的PCR片段在Sanger定序時遇到多種序列、polyA/T等定序問題；

或搭配Plasmid Midi萃取服務(使用NucleoBond® Xtra Midi Plus) ，幫助您輕鬆獲得大量質體。